坏死和凋亡是细胞死亡的两种方式 ,坏死的细胞一般加入PI 、DAPI即能区分死活 ,而流式检测凋亡的方法多种多样 ,最常见的为Annexin V/PI双染法和线粒体膜电位探针JC-1分析法 。
左图为Annexin/PI双染法测凋亡 ,左下象限为活细胞 ,右下象限为早期凋亡细胞(早期凋亡细胞外翻的PS能和探针Annexin V特异性结合) ,右上为晚期凋亡和坏死细胞 ,左上为彻底死亡的细胞 。右图为JC-1染色检测凋亡 ,选择绿色FITC和红色PE通道检测JC-1荧光 ,正常细胞膜电位正常 ,JC-1为多聚体状态发红光 ,细胞发生凋亡时 ,线粒体膜电位去极化 ,JC-1变成单体状态发出绿色的光 ,通过红光和绿光的偏移反应线粒体的膜电位变化 。
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